携带小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的构建及对 RAW264.7 细胞增殖的影响

目的 构建小鼠 Krüppel 样因子 4（KLF4）慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达小鼠腹腔巨噬细胞 RAW264.7 细胞株。方法 采用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增目的基因 KLF4 后,构建重组质粒 pLVX-KLF4,并 通过 PCR、双酶切和测序方法对其进行鉴定。重组质粒与 pSPAX2、pMD2.G 辅助质粒通过 Lipofectamine® 3000 共转 染 293T 细胞,包装病毒并测定病毒滴度。将获得的慢病毒感染 RAW264.7 细胞,实时定量 PCR 法检测 KLF4 mRNA 的表达。分选流式细胞仪分选 GFP 阳性 RAW264.7 细胞。流式细胞术检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞周期的影响。 EdU 法检测 KLF4 对 RAW264.7 细胞增殖的影响。结果 经 PCR、双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含小鼠 KLF4 基因的慢病毒穿梭质粒,RT-PCR 证实 Lenti-KLF4 感染的 RAW264.7 细胞中 KLF4 mRNA 表达高于未感染的 对照组 RAW264.7 细胞（P＜0.05）。初次浓缩后测定小鼠 KLF4 基因重组慢病毒的滴度为 2.05×108 TU/mL。分选出 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞。KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞周期变化显示为 S 期延长,G0/G1 期缩短。EdU 检 测显示 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞增殖活性增高。结论 成功构建了 KLF4 的慢病毒表达载体,并建立 KLF4 过表达的 RAW264.7 细胞株,KLF4 过表达促进了 RAW264.7 细胞的增殖。     

Notch信号通路调控Treg/Th17细胞机制的研究进展

摘要： Notch家族是多细胞生物发育过程中一类高度保守的、 十分重要的跨膜信号蛋白, 通过与相邻细胞之间的相互作用, 在细胞增殖、 分化、 凋亡中发挥着关键作用。调节性T细胞 （Treg） 及辅助性T细胞17 （Th17） 是目前发现的一类新型CD4+ T细胞亚群, 在生理状态下, 两者可通过分泌多种细胞因子来调节机体免疫的平衡。近年来, 越来越多的研究发现Notch信号通路通过调控Treg、 Th17细胞参与机体多种疾病的发生。本文就Notch信号通路在血液系统疾病、 自身免疫系统疾病等疾病中对Treg/Th17细胞调控机制的研究进展作一简要综述。     

中性粒细胞缺乏血液病患者并发嗜麦芽窄食单胞菌败血症的临床特征和预后分析

目的 探讨中性粒细胞缺乏血液病患者发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症的临床特征和预后因素。方法 回顾性分析我科2006年1月—2016年12月收治的32例发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症合并中性粒细胞缺乏患者的临床资料。结果 32例患者中急性白血病20例, 重型再生障碍性贫血 （SAA） 7例, 非霍奇金淋巴瘤5例。所有患者长时间应用广谱抗生素, 中心静脉置管 （21例） 或者外周静脉置管 （11例）。25例化疗后出现中性粒细胞缺乏, 7例SAA 为本病导致中性粒细胞缺乏。死亡17例, 好转15例。药敏试验显示多药耐药, 替加环素、 甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、 左氧氟沙星、 头孢哌酮/舒巴坦、 头孢他啶、 哌拉西林/他唑巴坦部分敏感, 其余均耐药。重度中性粒细胞缺乏、 重度血小板减少、 粒细胞减少持续时间过长和复合感染等是预后不良因素。结论 中性粒细胞缺乏血液病患者并发嗜麦芽窄食单胞菌败血症死亡率高, 及时诊断和治疗对预后至关重要。     

204株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的临床特点和耐药性分析

摘要： 目的 分析204株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的临床分布、 患者因素和耐药性, 为临床合理有效使用抗菌药物提供科学依据。方法 采取VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统对2017年1月—12月我院分离的204株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌进行鉴定及药敏试验, 分析临床分布、 标本来源。比较患者不同因素对耐碳青霉烯铜绿假单胞菌检出率的影响。比较呼吸道与非呼吸道分离株、 ICU与普通病房分离株的耐药性差异。结果 204株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌分布于ICU 97株、 普通病房107株。标本来源以呼吸道为主, 共169株, 占82.84%; 非呼吸道35株,占17.16%。有基础疾病、 近90 d使用抗菌药物、 进行侵入性操作以及菌株检出时间距入院时间＞48 h的患者耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的检出率均分别高于无基础疾病、 近90 d未使用抗菌药物、 未进行侵入性操作以及菌株检出时间距入院时间≤48 h的患者 （P＜0.01）。呼吸道标本组对头孢他啶、 环丙沙星的耐药率显著低于非呼吸道标本组 （P＜ 0.05）, 余12种抗菌药物耐药率差异无统计学意义 （P＞0.05）。普通病房分离株对替卡西林/克拉维酸、 头孢哌酮/舒巴坦、 阿米卡星、 头孢吡肟、 庆大霉素耐药率显著低于ICU病房 （P＜0.05）, 余9种抗菌药物耐药率差异无统计学意义（P＞0.05）。204株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌对亚胺培南、 美罗培南耐药率差异无统计学意义 （P＞0.05）。结论 耐碳青霉烯铜绿假单胞菌感染多发生于院内, 在ICU、 普通病房, 呼吸道、 非呼吸道的耐药形势已同样严峻, 应引起临床高度重视。     

以截瘫为临床表现的弥漫性大B细胞淋巴瘤合并甲状腺肿瘤一例

弥漫性大B细胞淋巴瘤 （DLBCL） 是非霍奇金淋巴瘤 （NHL） 中最常见的一个亚型, 发病年龄范围宽, 在临床特征、 侵袭部位、 组织形态学、 分子遗传学、 免疫表型等方面均表现出明显的异质性。此外, 随着恶性肿瘤诊治水平的提高, 同一患者存在多原发性恶性肿瘤 （MPMT） 的报道呈上升趋势。本文报告我科收治的以截瘫为临床表现的 DLBCL合并甲状腺肿瘤1例。     

18 F-FDG PET/CT在宫颈鳞癌治疗后鳞状细胞癌抗原升高患者中的应用价值

摘要： 目的 探讨18 F-FDG PET/CT在宫颈鳞状细胞癌治疗后血清鳞状细胞癌抗原 （SCC-Ag） 升高患者中的应用价值。方法 回顾性分析52例宫颈鳞癌手术和 （或） 放、 化疗后血清SCC-Ag升高 （＞1.5 μg/L） 患者, 18 F-FDG PET/CT 全身扫描查找有无复发和 （或） 转移灶。以病理学和 （或） 随诊结果为诊断标准, 评价PET/CT对宫颈鳞癌复发和 （或）转移的诊断效能。随访时间6~12个月。结果 PET/CT发现异常代谢增高灶者44例, 阴性表现者8例。42例患者经组织病理或临床随诊证实复发和 （或） 转移, PET/CT诊断宫颈鳞癌术后复发和 （或） 转移假阳性3例、 假阴性1例, PET/ CT诊断宫颈鳞癌复发和 （或） 转移的敏感度为97.6% （41/42）, 特异度为70.0% （7/10）, 阳性预测值为93.2% （41/44）, 阴性预测值为87.5% （7/8）, 准确度为92.3% （48/52）。PET/CT显像诊断结果与组织病理 （和） 或临床随诊结果具有高度一致性 （Kappa值=0.732）。结论 18 F-FDG PET/CT是宫颈鳞癌治疗后SCC-Ag升高患者复发和 （或） 转移的有效诊断方法, 具有重要的临床应用价值。     

Bcl-2抑制剂用于急性髓系白血病靶向治疗的研究进展

摘要： 急性髓系白血病 （AML） 是成人最常见的急性白血病, 诱导化疗仍是AML的一线治疗手段。但是, 由于 AML诱导化疗毒性较高, 且有高失败率及高复发率的特点, 在AML患者中应用受限。近年来, 去甲基化药物地西他滨和阿扎胞苷在AML表观遗传学治疗中得到深入研究, 已经动摇了诱导化疗在AML治疗中的地位。随着对AML生物学研究的深入, 发现越来越多的靶点可影响AML的生物学进程。针对这些靶点的靶向药物分为3类： 第一类是突变位点抑制剂, 如FLT3和IDH抑制剂; 第二类是调节代谢或信号通路的抑制剂, 如Bcl-2拮抗剂及表观遗传学药物;第三类是靶向细胞毒性药物。2017年美国血液学年会报道, AML靶向治疗最有前景的药物为调节代谢或信号通路的抑制剂, 其中BCL-2抑制剂Venetoclax在AML的临床试验报告被评为本届会议最佳。本文就BCL-2抑制剂在 AML的治疗进展做一综述。     

Synthesis of stable isotope‐labeled nasturlexins and potential precursors to probe biosynthetic pathways of cruciferous phytoalexins

The syntheses of perdeuterated phytoalexins nasturlexins A and C, and putative biosynthetic precursors, including phenylethyl isothiocyanates and phenylethyl dithiocarbamates, using commercially available [2,3,4,5,6‐D₅]phenylalanine, [2,3,4,5,6‐D₅]nitrobenzene, and [2,3,4,5,6‐D₅]benzaldehyde are described. In addition, application of an efficient deuterium‐hydrogen exchange transformation to nonlabeled starting materials allowed access to new deuterated compounds, including 3‐hydroxyphenylethyl glucosinolate.